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Objetivo de inmersion
Objetivo de inmersión en agua
En microscopía óptica, un objetivo de inmersión en agua es una lente objetiva especialmente diseñada para aumentar la resolución del microscopio. Esto se consigue sumergiendo tanto la lente como la muestra en agua, que tiene un índice de refracción más alto que el del aire, aumentando así la apertura numérica de la lente del objetivo.
Los objetivos de inmersión en agua se utilizan no sólo con aumentos muy grandes que requieren un alto poder de resolución, sino también de potencia moderada, ya que hay objetivos de inmersión en agua de hasta 4X. Los objetivos de gran potencia de aumento tienen distancias focales cortas, lo que facilita el uso del agua. El agua se aplica al espécimen (microscopio convencional), y la platina se eleva, sumergiendo el objetivo en el agua. A veces, con los objetivos de inmersión en agua, el objetivo se sumerge directamente en la solución de agua que contiene las muestras a observar. Las preparaciones electroforéticas utilizadas en el caso del ensayo del cometa pueden beneficiarse del uso de objetivos de agua.
El índice de refracción del agua (1,33) está más cerca de los materiales fotografiados o del cristal del cubreobjetos, por lo que este tipo de objetivo recoge/enfoca más luz que los de inmersión en aire, lo que da lugar a una gama de aperturas numéricas (NA) más alta[1].
Definición de objetivo de inmersión en aceite
Un microscopio debe cumplir unos requisitos especiales para rendir satisfactoriamente en (electro)fisiología: alta estabilidad mecánica para permitir el cambio sin vibraciones de los componentes, libre acceso a la zona de la muestra,
La continua innovación de Leica Microsystems en el campo de la microscopía aporta las ventajas de los objetivos de inmersión en agua de alta resolución a las aplicaciones de células vivas a 37 °C, a los experimentos de larga duración y al cribado. gheg.com
El portal está apoyado conjuntamente por el Instituto Austriaco para el Desarrollo Sostenible, el foco de investigación Sostenibilidad y Gestión Medioambiental, la Universidad de Ciencias Económicas de Viena, y el Instituto de Investigación Europa Sostenible de Viena en nombre del Ministerio Federal
para detectar burbujas causadas por fugas de gas («pruebas de burbuja», según la terminología reglamentaria) – han sido sustituidas por máquinas de prueba automáticas basadas en la tecnología de vacío, la espectrometría de masas y la medición de fugas de gas con helio.
Objetivo de inmersión en agua nikon
Los objetivos de inmersión en agua automatizados y patentados con una apertura numérica muy alta proporcionan y capturan más fotones y ofrecen una mayor resolución en XYZ que los objetivos convencionales; de hecho, capturan hasta cuatro veces más luz que los objetivos aéreos de alta apertura numérica.
Se pueden beneficiar de dos maneras: Las muestras delicadas de células vivas pueden excitarse con menos luz para protegerlas del fotodaño o puede aumentar significativamente el rendimiento de aplicaciones como la adquisición de pilas 3D.
Células HeLa marcadas con Hoechst (núcleos, azul), anti-a-tubulina-AlexaFluor® 488 (tubulina, verde) y TRITC-Falloidina (actina, naranja). Las imágenes se adquirieron utilizando los mismos ajustes de exposición y se muestran con los mismos ajustes de contraste. Izquierda: Objetivo aéreo. Derecha: Objetivo de inmersión en agua.
Microtejidos de hígado humano 3D InSight™ de InSphero marcados con Hoechst (núcleos, azul) y tinción de la membrana plasmática CellMask™ Deep Red (membranas, rojo). Izquierda: objetivo de aire. Derecha: Objetivo de inmersión en agua.
Lente de objetivo de inmersión en aceite
Para examinar especímenes con grandes aumentos utilizando el microscopio, hay una serie de factores que deben tenerse en cuenta. Entre ellos se encuentran la resolución, la apertura numérica (NA), la distancia de trabajo de los objetivos y el índice de refracción del medio a través del cual la lente frontal de un objetivo recoge la imagen. En este artículo, veremos brevemente cómo el uso de un medio de inmersión entre el cubreobjetos y la lente frontal del objetivo ayuda a aumentar la AN y la resolución. Además, consideraremos el índice de refracción del aire y del vidrio con el que se componen los portaobjetos y los cubreobjetos y cómo se utiliza un medio de inmersión para reducir parcialmente el desajuste cuando la luz viaja de un medio a otro. También se ofrecen consejos prácticos para utilizar sistemas de inmersión en aceite, así como las ventajas de utilizar objetivos de inmersión en agua, especialmente cuando se obtienen imágenes de células vivas.
Uno de los principales problemas de la microscopía óptica es superar algunos de los límites de la resolución óptica y aumentar la NA del sistema. En resumen, la NA de un objetivo es la capacidad de recoger la luz de una muestra, mientras que la resolución es la capacidad de un objetivo para distinguir los detalles de la muestra.